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Desarrollo de un sistema de transformación genética para Paracoccidioides brasiliensis

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2003-10-14

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Corporación para investyigaciones Biológicas (CIB)

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Presentamos e l informe final de un proyecto que comenzó a desarrollarse en octubre de 1999 y fue prorrogado hasta febrero del 2002. El proyecto permitió desarrollar un sistema de transformación para el hongo Paracoccidioides brasifiensis, el cual fue facilitado por la bacteria Agrobacterium tumafaciens. Esta bacteria gram-negativa es el único organismo conocido que es capaz de transferir ADN entre reinos. A. tumefaciens se ha emp leado por muchos años para transformar plantas dicotiledóneas, lo cual realiza al introducir un plasmido Ti dentro de las célu las de la planta (1). Recientemente se reportó que esta bacteria era también capaz de transformar representantes del reino de los hongos, así como células mamíferas (2-3). Galgiani y Col publicaron un modelo de transformación genética para el hongo patógeno Coccidiodes immitis, (4) en el cual el A. tumeJaciens fue usado para realizar la transformación por cocultivo con el hongo. En este experimento se usaron los plásmidos pAD 1624 Y pAD 1625 , los cuales fueron introducidos a la bacteria por electroporación; estos plásmidos contenían el gen que codifica para la enzima higromicina - fosfotransferasa (hph), la cual se utilizó como marcador de selección con el fin de conferirle al hongo resistencia al antibiótico higromicina.

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