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Purificación y caracterización de lipopolisacáridos de Eikenella corrodens 23834 y Porphyromonas gingivalis W83

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col.comunidadvinculadaComunidad de odontólogos colombianoses_CO
col.contrato0261-2010es_CO
col.date.proyecto2015-04
col.programa.colcienciasPrograma nacional de ciencias y tecnologías de la saludes_CO
col.tipo.espArtículos de investigaciónes_CO
dc.audienceProfesoreses_CO
dc.audienceInvestigadoreses_CO
dc.coverage.spatialBogotáes_CO
dc.creatorGualtero Escobar, Diego Fernando
dc.creatorPorras Gaviria, Jeimy Paola
dc.creatorBernau Gutiérrez, Sebastián
dc.creatorBuitrago Ramírez, Diana Marcela
dc.creatorCastillo Perdomo, Diana Marcela
dc.creatorLafaurie Villamil, Gloria Inés
dc.creator.corporativoUniversidad de Kentucky, UKes_CO
dc.creator.corporativoUniversidad El Bosquees_CO
dc.creator.corporativoUniversidad Nacional de Colombia, UNALes_CO
dc.creator.mailinstitutouibo@gmail.comes_CO
dc.date.accessioned2018-10-04T17:56:23Z
dc.date.available2018-10-04T17:56:23Z
dc.date.embargoEndinfo:eu-repo/date/embargoEnd/2024-01-31es_CO
dc.date.issued2015
dc.descriptionLa purificación de lipopolisacáridos (LPS) o endotoxinas y su caracterización es un aspecto esencial para estudios que buscan aclarar el papel de estas biomoléculas de bacterias Gram negativas presentes en la cavidad oral y su relación con enfermedades locales periodontales y sistémicas. Este estudio implementa una metodología para la extracción, purificación y caracterización de LPS a partir de bacteria completa de Eikenella corrodens 23834 y Porphyromonas gingivalis W83, utilizando técnicas previamente descritas. La extracción cruda de LPS se realizó con fenol-agua caliente; la purificación se realizó con tratamiento enzimático con nucleasas y proteasa, seguido de cromatografía de exclusión por tamaño (Sephacryl S-200 HR) con deoxicolato de sodio como fase móvil. La caracterización de los extractos purificados se realizó por barrido espectrofotométrico, pruebas bioquímicas de electroforesis SDS-PAGE, ensayo Purpald y la prueba cromogénica de LAL. Como control para la identificación y caracterización de los extractos purificados se utilizaron LPS comerciales de Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Rodobacter sphaeroides y Porphyromonas gingivalis. La metodología implementada permitió la obtención de LPS de elevada pureza con la identificación de KDO o heptosas, un quimiotipo de LPS-S (liso) para E. corrodens y LPS-SR (semi-rugoso) para P. gingivalis W83. Ambos LPS purificados mostraron capacidad endotóxica a bajas concentraciones. La metodología implementada en este estudio para la purificación y caracterización de LPS a partir de bacteria completa fue eficiente al compararla con los LPS comerciales.es_CO
dc.description.abstractPurification of lipopolysaccharide (LPS) or endotoxins and its characterization is an important aspect for studies aimed at clarify the role of these biomolecules from Gram negative bacteria present in the oral cavity and its relationship with periodontal and systemic diseases. This study describes an extraction, purification and characterization method of LPS from Eikenella corrodens 23834 and Porphyromonas gingivalis W83. LPS extraction was performed by using hot phenol-water; the purification was done with nuclease and protease enzymatic treatment, followed by size-exclusion chromatography (Sephacryl S-200 HR) with sodium deoxycholate as mobile phase. The characterization of the purified extracts was performed by spectrophotometric scanning, SDS-PAGE biochemical tests, Purpald assay and chromogenic LAL test. As control, commercial LPS from Escherichia coli, Salmonella typhimurium, P. gingivalis, and Rodobacter sphaeroides were used. The methodology mentioned above had allowed obtaining high purity LPS by identifying KDO or heptoses, a chemotype S-LPS (smooth) to E. corrodens; SR-LPS (semi-rough) for P. gingivalis W83. Both purified LPS showed endotoxic capacity at low valoraconcentrations. The methodology used in this study for purification and characterization of LPS from the whole bacteria was efficient when it was compared with commercial LPS.es_CO
dc.description.isprojectnoes_CO
dc.description.projectid1308-519-28960es_CO
dc.description.projectnameInducción de disfunción endotelial in vitro por lipopolisacarido de bacterias periodontopaticas e inhibición de la inflamación por resolvina (rvd1) y estatina (rosuvastatina)es_CO
dc.description.sponsorshipDepartamento Administrativo de Ciencia, Tecnología e Innovación [CO] Colcienciases_CO
dc.formatpdfes_CO
dc.format.extent11 páginases_CO
dc.identifier.issn0123-3475
dc.identifier.urihttps://repositorio.minciencias.gov.co/handle/20.500.14143/22041
dc.language.isospaes_CO
dc.relation.ispartofInducción de disfunción endotelial in vitro por lipopolisacarido de bacterias periodontopaticas e inhibición de la inflamación por resolvina (rvd1) y estatina (rosuvastatina). La publicación completa está disponible en : <a href="http://repositorio.colciencias.gov.co:80/handle/11146/22037" target="blank">http://repositorio.colciencias.gov.co:80/handle/11146/22037</a>
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/embargoedAccesses_CO
dc.sourceRevista Colombiana de Biotecnología. Vol. XVI No. 1 Julio 2014 34-44es_CO
dc.source.bibliographicCitationContiene 47 referencias bibliográficas. Véase el documento adjuntoes_CO
dc.subject.keywordEndotoxin
dc.subject.keywordKeto
dc.subject.keywordChromatography
dc.subject.keywordLimulus test (LAL)
dc.subject.keywordPeriodontitis
dc.subject.keywordDeoxyoctonate (KDO)
dc.subject.lembCavidades periodontaleses_CO
dc.subject.lembEncías -- Enfermedadeses_CO
dc.subject.lembEnfermedades periodontales -- Prevenciónes_CO
dc.subject.lembDientes -- Cuidado -- Higienees_CO
dc.subject.spinesEnfermedades de la bocaes_CO
dc.subject.spinesBacteriologíaes_CO
dc.titlePurificación y caracterización de lipopolisacáridos de Eikenella corrodens 23834 y Porphyromonas gingivalis W83es_CO
dc.title.alternativePurification and characterization of lipopolysaccharide from Eikenella corrodens 23834 and Porphyromonas gingivalis W83es_CO
dc.typeArtículo científicoes_CO
dc.type.driverinfo:eu-repo/semantics/articlees_CO
dc.type.hasversioninfo:eu-repo/semantics/publishedVersiones_CO
dspace.entity.typePublication

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