Informes Finales

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https://repositorio.minciencias.gov.co/handle/20.500.14143/49930

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    Estudios complementarios de taxonomía molecular dirigidos al desarrollo de una prueba de PCR, como herramienta epidemiológica para la detección y diferenciación de clades del género Leptospira en portadores renales y genitales.
    (2006-05) Gallego Beltran, Juan Fernando; Colombia. Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural. Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria (CORPOICA) (Bogotá, Colombia)
    El grupo de investigación en Leptospira y Leptospirosis del Programa Nacional de Salud Animal de Corpoica ha venido, desde 1995, realizando investigaciones en la biología de las leptospiras, con el apoyo de Colciencias y el Ministerio de Agricultura. De esta manera, el grupo ha generado conocimiento de importancia nacional e internacional en la línea de Taxonomía Molecular de las Leptospiras. Para continuar complementando el conocimiento de las relaciones filogenéticas y sistemáticas de estas bacterias, se presenta el siguiente proyecto, el cual persigue generar información mediante investigación básica, la cual pueda ser convertida, mediante un proceso de investigación aplicada, en un método de diagnóstico rápido, sensible y específico para la detección de portadores renales y/o genitales de leptospiras. Esta identificación es esencial para la implementación de planes de control de esta zoonosis, la cual se presenta tanto en poblaciones animales como humanas del país. Durante la realización del proyecto se irá conformando una genoteca (incluyendo una librería genómica del gen 16S rRNA) tanto de aislamientos Colombianos como de cepas referenciales, con el cual se podrá generar información genética acerca del gen 16S rRNA, dada su importancia como herramienta taxonómica y sistemática. La información obtenida será utilizada para localizar regiones constantes y variables del gen, que puedan ser potencialmente usadas como blanco para su amplificacion por PCR, con el fin de detectar y diferenciar entre las leptospiras de carácter patógeno y las saprófitas. Una vez se desarrolle, optimice y estandarice la PCR, esta será probada como herramienta epidemiológica en poblaciones bovinas a riesgo. La metodología a utilizar incluye la amplificación del gen mediante el uso de oligonucleótidos iniciadores universales externos y específicos internos, la ligación transformación y clonación del gen en células competentes y su secuenciacion (reacción de terminación en cadena). Posteriormente se aplicarán herramientas bioinformáticas para el análisis de las secuencias obtenidas con el fin de identificar las regiones de interés. La estrategia de transferencia y comunicación incluye presentaciones en reuniones internacionales y nacionales, publicación de artículos científicos o técnicos en revistas nacionales e internacionales, elaboración de protocolos y formación de jóvenes investigadores.